GFP（綠色熒光蛋白）

Green Fluorescent Protein

蛋白質研究的綠色探照燈

1 GFP簡介 & 結構

• Aequorea victoria （維多利亞多管發光水母）

  
  

• 2008年諾貝爾化學獎

  
  

• 授予研究人員諾貝爾獎

  
  

• 圖示結構標注：

  
  

• β-桶狀結構

  
  

• 發光基團 Ser65-Tyr66-Gly67

  
  

2 主要特點

• 自發熒光（無需底物或輔助因子）

  
  

• 低毒性（對細胞無害）

  
  

• 光穩定性好（不易漂白）

  
  

• 在藍光激發下發出明亮綠光

  
  

• 光譜圖數據：

  
  

• 激發峰 488nm（藍光）

  
  

• 發射峰 509nm（綠光）

  
  

3 作用機理

• 能級圖示：吸收(光能) -> 激發 -> 內轉換 -> 弛豫 -> 熒光發射(綠光)

  
  

• 能級標注：Em (激發態), Ee (激發態級), E0 (基態)

• 
  

  
  

4 主要用處：活細胞成像工具

• 實時追蹤基因表達

  
  

• 標記目標蛋白并觀察動態變化與定位

  
  

• 圖示標注：細胞核標記、線粒體標記

  
  

• 轉基因動物

• 組織成像

  
  

• 衍生熒光蛋白

  
  

• EGFP, YFP, RFP (DsRed), mCherry

  
  

• 生物醫學篩選

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