重組蛋白類藥物由遺傳修飾的原核或真核宿主細胞培養(yǎng)/發(fā)酵 產生。在目標蛋白的發(fā)酵過程中，由于宿主細胞的凋亡/死亡/ 裂解，宿主細胞產生的其它蛋白質也可能釋放到細胞培養(yǎng)基/ 發(fā)酵液中，即為宿主細胞蛋白（HCP）。HCP可能會引起機體 免疫反應，從而產生類佐劑作用——增強機體對藥物的免疫應 答。HCP也可能是一些酶類，具有分解目標蛋白或人體蛋白的 作用，導致藥物不穩(wěn)定或進入人體后引發(fā)一系列不良反應。因 此，生物制藥公司不斷優(yōu)化純化工藝，從而控制終產品中HCP 的種類和含量。 目前常用的HCP檢測方法為酶聯(lián)免疫法（ELISA）。該方法具 有較高的靈敏度，但也存在一些局限性。LC-MS方法是ELISA 的有利補充。與ELISA相比，LC-MS方法具有以下優(yōu)點：第 一，可以鑒定HCP的種類；第二，可以獲得單個HCP的含量信 息；第三，可用于不同工藝所得產品的橫向對比。由于LC-MS 的以上優(yōu)點，LC-MS作為HCP的檢測受到廣泛關注和使用。例 如，Huang等[1]以NIST mab為例，發(fā)展了基于LC-MS檢測HCP 的前處理方法。LC-MS在HCP檢測中的廣泛使用，推動了相 關分離、檢測和數(shù)據(jù)分析技術的發(fā)展。但多樣的技術選擇也為 HCP的分析帶來一些疑問： 第一、 大部分關于HCP的研究均以抗體為分析對象。在抗體 的分析中，native酶解可有效抑制主蛋白的酶切，從而提升HCP 的鑒定。在生物制藥中，除抗體以外，還有大量的重組蛋白產 品，這些產品的酶解應該采用什么前處理方法？ 第二、 在HCP的檢測中有nanoLC-MS和UHPLC-MS兩種分離 檢測方法，這兩種方法各自的優(yōu)缺點是什么，應該選擇哪一種 方法？ 第三、 常聽人說，DIA采集數(shù)據(jù)有利于提升鑒定量，是否用 DIA采集HCP可顯著提升HCP鑒定量？

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