鑒于間充質干細胞（MSCs）具有自我增殖和分化為多種細胞類型的能力，已然成為再生醫學中頗具吸引力的候選細胞。目前為止，僅開展有限數量的關于間充質干細胞來源外泌體的人體臨床試驗，仍有許多問題亟待解決，如異質性細胞外囊泡群體是否有益；某些特定亞群是否代表了間充質干細胞在目標組織或細胞上的特定功能，如何標準化sEVs的分離和純化流程的基礎上保證高產量、低成本的確定的成分以實現其臨床應用。

南京醫科大學李晶教授團隊發表了名為《Distinct molecular properties and functions of small EVsubpopulations isolated from human umbilical cordMSCs using tangential flow filtration combined with size exclusion chromatography》的文章，該文章的目的是建立適用于大規模生產間充質干細胞sEVs方案，提供了一種利用切向流過濾（TFF）結合尺寸排阻色譜法（SEC）從人臍帶間充質干細胞（HucMSCs）中大規模制備sEVs的方法。所得到的亞群S1-sEVs和S2-sEVs在粒徑、膜標記蛋白和攜帶標志物方面表現出穩定的差異。進一步的研究表明，兩種不同的sEVs亞群分別對應不同的生物學過程：ESCRT途徑和由脂筏代表的ESCRT獨立途徑，驗證了用間充質干細胞中大規模分離和純化具有不同功能的sEVs亞群的可能性，為各種間充質干細胞適應癥的靶向治療干預提供了可能性。

文中將TFF與SEC系統結合，從人臍帶間充質干細胞培養基中分離出sEVs。對不同亞群的粒徑、濃度進行表征，對兩種亞群蛋白組學、RNA組成情況、S1-sEVs和S2-sEVS對細胞增殖和巨噬細胞極化的不同調控作用等一些列表征，證明該方法對于間充質干細胞中大規模分離和純化具有不同功能的sEVs亞群是可以實現的。

圖1. 通過TFF與SEC結合系統分離并表征人臍帶間充質干細胞中的sEVs亞群

圖1中采用德國ZetaView納米顆粒跟蹤分析儀對分離出的不同組分進行粒徑和濃度表征，并與TEM檢測結果結合，揭示了S1-sEVs粒徑范圍70-200nm，峰值粒徑113.3；S2-sEVS粒徑范圍50-160nm，峰值粒徑為88.3nm，實現對多組分精準區分。

通過一系列實驗包括S1-sEVs和S2-sEVS亞群在后肢缺血、皮膚傷口愈合和在生物生成過程的差異調節，進一步證明不同亞群的間充質干細胞sEVs針對特定疾病的治療效果是有差異的，見圖2和圖3。

圖3. S1-sEVs和S2-sEVs在后肢缺血中的不同治療效果

雖然源自間充質干細胞的sEVs在臨床應用上備受推崇，但本文的研究引入新的概念，即利用不同間充質干細胞的sEVs亞群針對定疾病進行靶向治療，細化了不同亞群sEVs對于疾病的治療效果，為間充質干細胞和sEVs亞群的應用指明了新的方向。